背景资料 | |
背景简介 | 随着人们生活水平的提高,饮食习惯的改变,肿瘤发病率也在不断的增加,如肝癌、胃癌和大肠癌等明显增加的趋势。肝脏作为人体重要的器官,在整个物质代谢过程中具有广泛而多样的功能。肝脏也是体内药物代谢的重要器官,体内复杂的环境对药物代谢等的影响是不言而喻的。但是在体研究药物或其它化学物质在肝细胞代谢的分子机制有一定的困难,因此我们建立体外的原代肝细胞培养模型用于肝细胞分子生物学特征的研究,作为对在体肝脏研究模型的有益补充。采用改良的灌流方法将肝脏中的肝实质细胞分离、纯化、体外培养,全面分析原代肝细胞的生长和功能状态,为肝细胞分子生物学特征的研究以及新药对肝脏的作用机制的研究提供更有价值的线索,以更好的解释药物作用的机制。 |
基本信息 | |
名称 | 小鼠原代肝实质细胞 |
种属 | 小鼠 |
组织来源 | 正常肝组织 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞形态 | 上皮细胞样,多角形细胞样 |
冻存条件 | 冻存液:90%FBS,DMSO 10%;建议使用非程序冻存液盒货号:LBH-001 |
培养条件 | 生长培养基:基础培养基500ml;生长添加剂5ml;胎牛血清25ml;双抗5ml 生长气相:空气95%,CO2,5%,;温度:37℃,培养箱湿度:70%-80%。 |
传代比例 | 1:2传代 |
倍增时间 | 该细胞终末分化细胞增殖能力很弱 |
换液频率 | 2-3天换液一次 |
细胞检测 | 葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase)化学染色为阳性免疫荧光鉴定,细胞纯度可达90%以上,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 |
产品使用 | 仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
细胞接受 处理流程 | ⑴收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,不开瓶盖放培养箱静置2-3小时稳定细胞状态。 ⑵镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,重新加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2培养箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存。 ⑶悬浮细胞需离心收集处理。抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心3-5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。 |