背景资料 | |
背景简介 | 兔原代肾足细胞分离自正常肾脏组织,肾小球为血液过滤器,肾小球毛细血管壁构成过滤膜。肾小球过滤膜从内到外有三层结构:内层为内皮、中层为肾小球基膜、外层为上皮细胞层,上皮细胞又称足细胞,其不规则突起称足突,其间有许多狭小间隙,血液经滤膜过滤后,滤液入肾小球囊。在正常情况下,血液中绝大部分蛋白质不能滤过而保留于血液中,仅小分子物质如尿素、葡萄糖、电解质及某些小分子蛋白能滤过,肾足细胞即肾小球上皮细胞,它附着于肾小球基底膜的外侧,连同肾小球基底膜和肾小球基膜一起构成了肾小球血液滤过屏障。又由于正常成年机体的肾脏足细胞是一种终末分化细胞,体外培养的原代细胞不能增殖,足细胞呈星型多突状,胞体较大,由胞体伸出许多突起,呈指状交叉覆盖于肾小球基底膜外表面,并通过黏附分子和蛋白多糖分子与肾小球基底膜相连。足细胞在正常情况下可以分泌肾小球基底膜的主要组成成分IV型胶原和纤维连接蛋白,在促肾纤维化引资等刺激下还能分泌具有降解肾小球基底膜作用的基质金属蛋白酶和组织蛋白酶,从而在肾小球基底膜的代谢平衡中发挥重要作用。 |
基本信息 | |
名称 | 兔原代肾足细胞 |
种属 | 兔 |
组织来源 | 正常肾脏组织 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞形态 | 不规则细胞样,含足突细胞样 |
冻存条件 | 冻存液:90%FBS,DMSO 10%;建议使用非程序冻存液盒货号:LBH-001 |
培养条件 | 生长培养基:基础培养基500ml;生长添加剂5ml;胎牛血清50ml;双抗5ml 生长气相:空气95%,CO2,5%,;温度:37℃,培养箱湿度:70%-80%。 |
细胞增值 | 每周 2 至 3 次 |
传代比例 | 1:2传代 |
换液频率 | 2-3天换液一次 |
细胞检测 | 广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性免疫荧光鉴定。细胞纯度可达90%以上,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 |
产品使用 | 仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
细胞接受处理流程 | |
⑴收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,不开瓶盖放培养箱静置2-3小时稳定细胞状态。 ⑵镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,重新加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2培养箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存。 ⑶悬浮细胞需离心收集处理。抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心3-5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。 |