背景简介

PBMC（peripheral blood mononuclear cell），外周血单个核细胞，顾名思义，其主要细胞类型为血液里边具有单个核的细胞，主要包括淋巴细胞（T cell＼B cell），单核细胞，巨噬细胞，树突状细胞和其他少量细胞类型。其中淋巴细胞占很大一部分。体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞。

基本信息

名称

人外周血单个核细胞PBMC

种属

人

组织来源

外周血

生长特性

贴壁生长，悬浮生长

细胞形态

混合体系

冻存条件

冻存液：90%FBS，DMSO 10%；建议使用非程序冻存液盒货号：LBH001

培养条件

生长培养基:基础培养基500ml；胎牛血清10ml；双抗5ml

生长气相:空气95%，CO2，5%,；温度：37℃，培养箱湿度：70%-80%。

传代比例

1:2传代

倍增时间

每周 2 至 3 次

换液频率

2-3天换液一次

细胞检测

PBMC是混合体系，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。细胞表型平均阳性百分比：

CD34 0.20%

CD3 70.70%

CD4 38.90%

CD8 24.50%

CD16 18.20%

CD19 10.60%

CD56 12.40%

产品使用

仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

细胞接受

处理流程

1收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，不开瓶盖放培养箱静置2-3小时稳定细胞状态。

2镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，重新加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2培养箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存。

3悬浮细胞需离心收集处理。抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心3-5分钟，弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中（加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基）。